Tampão TAE

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Tampão TAE (tampão Tris-Acetato-EDTA) é uma solução tampão usada em eletroforese em agarose, tipicamente para a separação de ácidos nucleicos tais como o DNA e RNA.1 Ele é feito de tampão acetato da base Tris, normalmente a pH 8.0, e EDTA, os quais sequestram cátions divalentes. TAE tem uma mais baixa capacidade que TBE e facilmente pode se exaurir, mas DNA de dupla cadeia linear migra mais rápido em TAE.

Usos[editar | editar código-fonte]

Tampão TAE é usado tanto como um tampão de corrida como em gel de agarose.2 TAE tem sido usado em várias concentrações para estudar mobilidade de DNA livre com e sem cloreto de sódio.3 Métodos em eletroforese em gel em gradiente denaturado para análise de mutações em amplo espectro têm sido também descritos.4

Formulação[editar | editar código-fonte]

Tampão TAE (50x)

Para preparar solução a 0.5 M de Na2 EDTA (pH 8.0) adicionar 18,612 g de etilenodiaminotetraacetato dissódico a 80 mL de água destilada. Agitar vigorosamente. Ajustar o pH a 8,0 com hidróxido de sódio, NaOH (aprox. 20 g de NaOH). Esterilizar por autoclavagem.

Observação. O sal dissódico do EDTA não irá permanecer em solução até o pH da solução ser ajustado a aproximadamente 8,0 pela adição de NaOH.

Referências[editar | editar código-fonte]

  1. Ogden, R.C., and Adams, D.A., Electrophoresis in agarose and acrylamide gels. Methods Enzymol., 152, 61-87 (1987).
  2. Sambrook, Fritsch, and Maniatis (1989) Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 2nd ed., Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, New York, volume 3, apendices B.11 and B.23
  3. Stellwagen, E., and Stellwagen, N.C., The free solution mobility of DNA in Tris-acetate-EDTA buffers of different concentrations, with and without added NaCl. Electrophoresis, 23(12), 1935-1941 (2002).
  4. Hayes, V.M. et al., Improvements in gel composition and electrophoretic conditions for broad-range mutation analysis by denaturing gradient gel electrophoresis. Nucleic Acids Res., 27(20), e29 (1999).

Ver também[editar | editar código-fonte]

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