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Relatório Bioquímica I - 2.2014 - Reações Enzimáticas

Bioquímica I

Tutora Juliana Gil Melgaço

Relátorio de Aula Pratica - 2 Alunos Cristina Terres Santos Marilia Cardoso Experimento II – Efeito da concentração de enzima na reação da Bromelina - Objetivo Verificar o quanto a concentração de enzimas pode altera a velocidade das reações enzimáticas. - Material Leite em pó, 10 ml de suco natural de abacaxi, 100 ml de água, 5 placas de Petri, 5 tubos de ensaio, 5 mexedores de café, 1 pazinha de plastico grande, 1 espátula, caneta de retroprojetor, estante para tubos, proveta de 10ml, 1 pipeta automática 1ml, 1 cronometro ou relógio, balança. - Procedimentos Devemos marcar as placas de Petri com a numeração de 1 a 5 e colocar em cada uma delas 10 gramas de leite em pó, pesados em balança de precisão. Misture em cada uma , 9 ml de água, medidos na pipeta, misture com os mexedores de café. Durante todo o processo as placas de Petri deverão estar cobertas. Numere os tubos de ensaio de 1 a 5 e coloque na estante para tubos. De acordo com a tabela abaixo, prepara-se diferentes concentrações de bromelina nos tubos de ensaio numerados, misture bem:

  Tubo                    Água    (ml)                    Suco de Abacaxi (ml)

1- Controle 4 0 2 3 1 3 2 2 4 1 3 5 0 4 Em cada placa de Petri adiciona-se 1 ml da solução de cada tubo de ensaio na respectiva placa de Petri (1ml da solução do tubo de ensaio 1 na placa de Petri de numero 1, e assim, sucessivamente). Misture bem a solução em cada amostra e acione o cronometro para cada uma. A cada cinco minutos passe a pazinha de plástico no fundo de cada uma das placas, observamos a consistência de cada amostra e anotamos em uma tabela. Quando a amostra formar um linha mostrando o fundo da placa dividindo a mistura em dois por mais de um minuto, considera-se o fim da reação para a respectiva placa, marca-se na tabela. - Resultado Tabela de coleta de dados No. Placa/ Tempo Velocidade Reação Concentração Enzima 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 1/ 0% - - - - - - - - - - - 2/25% - - - - - - - - - - Fim 0,018 1/mim 3/50% - - - - - Fim 0,033 1/min 4/75% - - - Fim 0,050 1/min 5/100% - Fim 0,1 1/min

vr = 1/min vr1 = 1/0 = 0 vr2 = 1/55 = 0,018 vr3 = 1/30 = 0,033 vr4 = 1/20 = 0,05 vr5 = 1/10 = 0,1 A caseína do leite sob a ação da bromelina hidrolisa as ligações peptídicas desta proteína, tendendo a enrijecer a mistura. Quando observamos a tabela e o gráfico podemos constatar que a reação enzimática é proporcional a quantidade de substrato/reagente, é uma reação gradativa. Em todas as amostras tivemos a mesma quantidade de substrato, valor de pH e a mesma temperatura, tendo como variável a concentração de enzimas, assim, a velocidade da reação é diretamente proporcional a quantidade de enzima presente no meio, dentro das condições estabelecidas anteriormente. Abaixo, gráfico referente a evolução do acima descrito.