Dapi

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A proteína chamada DAPI foi sintetizada pela primeira vez em 1971 no laboratório de Otto Dann, como parte de uma pesquisa de medicamentos para tratar a tripanossomíase. Não foi bem sucedido como medicação, mas houve a percepção científica que se ligava fortemente ao DNA (regiões adenina-timina), ficando mais fluorescente e de forma mais fraca se liga ao RNA também, causando fluorescencia menor.

Representação da estrutura química do DAPI

A coloração da DAPI pode ser comparada, ou seja, se assemelha com as colorações da Hoechst, por também serem manchas de fluorescencia azul. Normalmente é utilizada com outros métodos, para melhoras de resultado de imagem e imagens microscópicas que desejam usar múltiplas manchas fluorescentes em uma única amostra.

  • É amplamente utilizado em microscopia de fluorescência, sendo excitado com luz ultravioleta e detectado através de um filtro azul/ciano. DAPI é conveniente para microscopistas que desejam usar múltiplas manchas fluorescentes em uma única amostra. Quando ligado ao ADN de cadeia dupla, o DAPI tem um máximo de absorção a um comprimento de onda de 358 nm (ultravioleta) e o seu máximo de emissão é de 461 nm (azul).
  • Fluorescência forte quando ligado ao DNA levou à rápida adoção de DAPI para coloração fluorescente de DNA para microscopia de fluorescência. Seu uso para detecção de DNA em células de plantas , metazoários e bacterianos e partículas de vírus foi demonstrado no final da década de 1970, e a coloração quantitativa de DNA dentro das células foi demonstrada em 1977. O uso de DAPI como coloração de DNA para citometria de fluxo também foi demonstrado por volta dessa época.

https://www.tandfonline.com/doi/abs/10.3109/10520299509108199

[1] https://doi.org/10.3109%2F10520299509108199

[3] https://www.tandfonline.com/doi/abs/10.3109/10520299509108199