Método de aparelhagem de fluxo interrompido: diferenças entre revisões
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O método de aparelhagem de fluxo interrompido, do inglês "stopped-flow", consiste uma técnica de laboratório utilizada para estudar reações rápidas, onde é possível monitorar, por exemplo, o dobramento de proteínas e obter valores cinéticos da reação. Para a observação de fases iniciais do processo de dobramento, é preciso observar a renaturação de proteínas retornando ao estado nativo, um processo rápido. Através da técnica ''stopped-flow'', proteínas que estejam desnaturadas em solução, seja através do pH ou por algum agente desnaturante, possam ser diluída ou ter seu pH modificado a partir da injeção simultânea de um segundo reagente, permitindo assim o dobramento proteico. O dobramento pode ser monitorado. Existe um intervalo entre o tempo em que tem início a mistura dos reagentes e o tempo em começam às medições chamado tempo morto. Este período varia entre aparelhos. Entretanto, existem mecanismos ultrarrápidos de mistura contendo tempo morto menor de 40µs.<ref>VOET, Donald; VOET, Judith G. Bioquímica. 4. ed. Porto Alegre, Artmed, 2013</ref><ref>CHANG, R.Físico-Química: Para as Ciências Químicas e Biológicas. 3. Ed: AMGH editora, 2010</ref> |
O método de aparelhagem de fluxo interrompido, do inglês "stopped-flow", consiste uma técnica de laboratório utilizada para estudar reações rápidas, onde é possível monitorar, por exemplo, o dobramento de proteínas e obter valores cinéticos da reação. Para a observação de fases iniciais do processo de dobramento, é preciso observar a renaturação de proteínas retornando ao estado nativo, um processo rápido. Através da técnica ''stopped-flow'', proteínas que estejam desnaturadas em solução, seja através do pH ou por algum agente desnaturante, possam ser diluída ou ter seu pH modificado a partir da injeção simultânea de um segundo reagente, permitindo assim o dobramento proteico. O dobramento pode ser monitorado. Existe um intervalo entre o tempo em que tem início a mistura dos reagentes e o tempo em começam às medições chamado tempo morto. Este período varia entre aparelhos. Entretanto, existem mecanismos ultrarrápidos de mistura contendo tempo morto menor de 40µs.<ref>VOET, Donald; VOET, Judith G. Bioquímica. 4. ed. Porto Alegre, Artmed, 2013</ref><ref>CHANG, R.Físico-Química: Para as Ciências Químicas e Biológicas. 3. Ed: AMGH editora, 2010</ref> |
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Revisão das 18h52min de 7 de maio de 2018
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O método de aparelhagem de fluxo interrompido, do inglês "stopped-flow", consiste uma técnica de laboratório utilizada para estudar reações rápidas, onde é possível monitorar, por exemplo, o dobramento de proteínas e obter valores cinéticos da reação. Para a observação de fases iniciais do processo de dobramento, é preciso observar a renaturação de proteínas retornando ao estado nativo, um processo rápido. Através da técnica stopped-flow, proteínas que estejam desnaturadas em solução, seja através do pH ou por algum agente desnaturante, possam ser diluída ou ter seu pH modificado a partir da injeção simultânea de um segundo reagente, permitindo assim o dobramento proteico. O dobramento pode ser monitorado. Existe um intervalo entre o tempo em que tem início a mistura dos reagentes e o tempo em começam às medições chamado tempo morto. Este período varia entre aparelhos. Entretanto, existem mecanismos ultrarrápidos de mistura contendo tempo morto menor de 40µs.[1][2]