Teste de Ames

Em Genética, o Teste de Ames é um método para detecção de agentes químicos mutagênicos. O método foi proposto em 1973 pelo cientista americano Bruce Ames e colaboradores . A identificação de compostos carcinogênicos é importante porque mutações no DNA são frequentemente associadas ao câncer.

Procedimento

Para o teste de Ames, são utilizadas cepas especiais de Salmonella typhimurium . A cepa de bactéria possui uma mutação que inativa a via de biossíntese de histidina. Como as bactérias são incapazes de produzir a própria histidina e sua única fonte é o ambiente, colônias desta cepa não crescem em meios com ausência do aminoácido, ao menos que haja uma mutação reversa que reestabeleça a via de biossíntese da histidina. Quaisquer mutações são mais comuns na presença de agentes mutagênicos, de modo que a mutação reversa é mais frequente na presença de agentes mutagênicos. Por isso, a cepa de Salmonella é cultivada em diferentes placas de Petri, em ausência de histidina, na presença de um potencial composto mutagênico. Quanto maior o número de colônias que cresceram, maior a frequência de mutações e mais mutagênico é o composto de interesse.

Extrato de fígado de mamífero podem ser adicionados ao meio de cultura para replicar os processos metabólicos dos seres humanos. Em mamíferos, enzimas hepáticas convertem certos compostos carcinogênicos inativos em sua forma ativa. Bactérias não possuem tais enzimas, de modo que, na ausência de extrato de fígado, alguns compostos de interesse podem não ser ativados e não serem convertidos em sua forma ativa e mutagênica. O extrato geralmente é obtido a partir do fígado de ratos e é denominado S9.