Ensaio cometa
O ensaio de eletroforese em gel de célula única (SCGE, também conhecido como ensaio cometa) é uma técnica simples e sensível para a detecção de danos no DNA no nível da célula eucariótica individual. Foi desenvolvido pela primeira vez por Östling & Johansson em 1984 e posteriormente modificado por Singh et al. em 1988.[1] Desde então, aumentou em popularidade como uma técnica padrão para avaliação de danos/reparos de DNA, biomonitoramento e testes de genotoxicidade. Envolve o encapsulamento das células em uma suspensão de agarose de baixo ponto de fusão, a lise das células em condições neutras ou alcalinas (pH > 13) e a eletroforese das células lisadas suspensas. O termo "cometa" refere-se ao padrão de migração de DNA através do gel de eletroforese, que muitas vezes se assemelha a um cometa. [2] [3]
Referências
- ↑ Singh, Narendra P.; McCoy, Michael T.; Tice, Raymond R.; Schneider, Edward L. (1 de março de 1988). «A simple technique for quantitation of low levels of DNA damage in individual cells». Experimental Cell Research (em inglês). 175 (1): 184–191. ISSN 0014-4827. PMID 3345800. doi:10.1016/0014-4827(88)90265-0
- ↑ Tice, R. R. (2000). «Single Cell Gel/Comet Assay: Guidelines for in vitro and in vivo Genetic Toxicology Testing». Environmental and Molecular Mutagenesis. 35 (3): 206–21. PMID 10737956. doi:10.1002/(SICI)1098-2280(2000)35:3<206::AID-EM8>3.0.CO;2-J
- ↑ Nandhakumar, S; Parasuraman, S; Shanmugam, M M; Rao, K R; Chand, P; Bhat, B V (2011). «Evaluation of DNA damage using single-cell gel electrophoresis (Comet Assay)». J Pharmacol Pharmacother. 2 (2): 107–11. PMC 3127337. PMID 21772771. doi:10.4103/0976-500X.81903
